آماده سازی نمونه های dna نشان دار برای استفاده در مطالعه های مکانوشیمیایی با استفاده از انبرک نوری

در سال های اخیر، شاهد بروز تحولی شگرف در بیوشیمی و زیست شناسی ساختاری هستیم که منشأ آن ایجاد رشته ای جدید در علم است که اغلب تحت عنوان بیوشیمی یا زیست شناسی تک مولکول شناخته می شود. از جمله فنونی که امکان چنین مطالعه ای را فراهم می کند، استفاده از ابزاری به نام انبرک نوری است که می توان پیشرفت های قابل ملاحظه در فهم دقیق تر فرآیندهای مولکولی درون سلولی و اتفاقاتی که در فرآیندهایی همچون رونویسی، همانندسازی و ترجمه رخ می دهند را به آن نسبت داد. بررسی خواص فیزیکی، همچون خاصیت کشسانی در نیروهای بالا در ماکرومولکول هایی مثل dna از جمله قابلیت های منحصر به فرد این ابزار است. در این پروژه خواص فیزیکی ژنوم فاژ لامبدا با استفاده از انبرک نوری بررسی شده است. ابتدا ?-dna با 48000 جفت باز و طولی حدود 16 میکرومتر در دو انتها توسط دو ترکیب بیوتین و دیجاکسیجنین نشان دار و سپس به گلوله های پوشیده شده با آنتی بادی آنتی دیگاکسیجنین و استرپتاویدین متصل شد. در نهایت ویژگی کشسانی dna با اعمال نیروی کششی توسط باریکه لیزر انبرک نوری مورد بررسی قرار گرفت. نتایج حاصل از کشش dna مذکور بسته به روش نشان دار کردن، متفاوت بود. برای dna نشان دار شده با بیوتین و دیگاکسیجنین کشش تا نیروی 10پیکونیوتن و برای dna نشان دار شده با بیوتین در هر دو انتها کشش تا 55 پیکونیوتن با موفقیت انجام شد.